随着3D细胞培养在体内相关性上的提高，3D模型在药物研发中的应用越来越广泛。然而，用于3D模型的成像技术却非常有限。
康宁的3D Clear组织透明化试剂作为一种组织透明化技术，专门用于支持3D细胞培养模型的成像和基于培养板的高通量分析。本篇文章将着重介绍如何使用康宁3D Clear组织透明化试剂实现对3D细胞培养的清晰成像。
为什么3D细胞培养的成像技术有限？
由于3D细胞培养物（包括类器官和类球体）结构的厚度（通常>100 μm）及不透明性，目前的成像技术无法穿透至组织中心，只能检测到外部的2-3层细胞，图像中心区域往往呈暗色。这些外部细胞通常暴露在化合物、营养素和氧气中，无法反映整个细胞群体的状态，严重影响分析的精确性。 针对3D细胞培养的成像技术是基于传统的2D细胞培养技术开发的，对3D模型进行成像很难获得清晰度较高的图像。
使用3D Clear组织透明化试剂实现对3D细胞培养的清晰成像
Tissue Clearing（组织透明化）技术可以使组织达到光学透明，使成像更清晰。Corning 3D Clear Tissue Clearing Reagent（康宁3D Clear组织透明化试剂）作为一种组织透明化技术经过专门优化，且被验证可用于3D细胞培养模型的成像和基于培养板的高通量分析。康宁3D Clear试剂与荧光标记 (如荧光蛋白、免疫荧光、化学染料) 以及高内涵共聚焦显微镜结合使用，可实现完整的3D细胞培养模型分析以及更准确的药物筛选。
使用3D Clear组织透明化试剂的表现
综上，康宁3D Clear组织透明化试剂具有以下优点：
● 快速实现组织透明化
● 使用简便
● 无需特殊设备
● 适用于免疫荧光 (IF)、荧光蛋白 (FP) 及其他荧光标记物
● 适用于微孔板及自动化操作
● 操作可逆，可用于后续的2D H&E/IHC染色
*10mL 10X洗涤缓冲液加90mL去离子水稀释成100mL 1X洗涤缓冲液
**叠氮化钠会干扰基于辣根过氧化物酶的实验方案，但对免疫荧光标记没有影响
***DMSO (Corning 25-950-CQC)
来源：荣格-《国际医药商情》